Північно Очоа: биография

Загальне уявлення про мРНК було сформульовано в 1960-ті, і в 1961 році Ніренберг і Маттау, на Міжнародному Конгресі з Біохімії в Москві, повідомили , що екстракт кишкової палички переносить поліуріділат (poly U) в поліфенілаланін. Це була найбільша розбурхує новина на конгресі, після якої стало зрозуміло, що відкривається велике поле для експериментів у вивченні генетичного коду. Між лабораторіями Північно і Ниренберга в наступні місяці почалася гонка з вивчення ефекту, який виявляється різними сополімерами на з'єднання амінокислот. Обчислюючи статистичне побудова триплетів у гетерополімерах, було можливо определіль їх співвідношення для більшості амінокислот. У роботу були залучені Пітер Ленгіел, Джо Спейер, Венді Стенлі і Альберт Вабха, але Очоа особисто проводив цей проект, і технічні ресурси факультету були повністю кинуті на синтез як можна більшого числа сполук, в яких потребувала робота по декодуванню.

Таким чином, щоб ідентифікувати триплети, що кодують кожну з 20 амінокислот, не знадобилося багато часу, як і на те, щоб показати, що код був зверненим у багатьох випадках, деякі триплети кодують однакові амінокислоти. Послідовність кодонів, що визначається амінокислоти, була визначена Філіпом Ледер і Маршаллом Ніренбергом після відкриття того факту, що послідовності кодонів специфічних підстав сприяли зв'язування особливих аміноацил-тРНК з рибосомою. Про це було оголошено на Міжнародному Конгресі з Біохімії в Нью-Йорку в 1964 році. Хімічним виділенням відповідної мРНК код для амінокислот красиво підтвердив Гобіно Хорана, використовуючи синтез олігоксірібонуклеотідов і транскрипцію з використанням РНК-полімерази. Кінцеві триплети були знайдені в ході оригінальних генетичних експериментів Сідні Бреннера в Кембриджі і Гарена в Єлі. Маркер з Кембріджа відкрив, що AUG-кодон, який ініціює ланцюг. Використовуючи полінуклеотіди, починаючи з AUG або дргого кодону, приготовані за допомогою полінуклеотідфосфорілази, лабораторія Північно визначила, що напрям читання - від 5 'до 3'. Він також in vitro визначив, що UAA - один з кінцевих кодонів.

Инициирующие гени синтезу білка

Відразу три групи - Салас і Стенлі у Очоа, Айзенштадт і Браверманн і Ревель з Гросов виявили, що природна мРНК, як MS2 і QB бактеріофагів переноситься неочищеними рибосомами кишкової палички, а рибосомами, промитими з 0,5 або 1М сульфатом амонію, не переноситься. Однак відмиті рибосоми легко переносять polyA або polyU, але не полімери, що починаються з AUG, які ведуть себе як природні мРНК. Було відкрито, що сульфат амонію вимиває міститься там білковий ген, названий «геном ініціації», потрібний для перенесення природного мРНК або полінуклеотидів, що починаються з AUG. Перші два гени, а пізніше і третій, були виділені і тепер називаються IF1, IF2 і IF3. У той же час Кларком і Маркером було показано, що поліпептидні ланцюги бактерій починаються зі специфічного метил-тРНКfMet, який естеріфіцірует метіонін, який, у свою чергу, виробляється і виявляється в поліпептидного ланцюга в кінцевій амінної позиції. Метил-тРНКfMet кодується AUG, і пролонгатор метил-тРНКfMet не може бути вироблений специфічної формілазой. З приводу розуміння ролі IF1 і IF3 і послідовності подій, які ведуть до ініціації утворення комплексу в кишковій паличці, велися суперечки та дебати, навіть у групі Очоа. Тепер це ясно завдяки дослідженням багатьох вчених.